色譜法也叫層析法，它是一種高效能的物理分離技術(shù)，將它用于分析化學(xué)并配合適當(dāng)?shù)臋z測(cè)手段，就成為色譜分析法。高效液相色譜法（HPLC）是繼氣相色譜之后，70年代初期發(fā)展起來(lái)的一種以液體做流動(dòng)相的新色譜技術(shù)。上海液相色譜儀

詳細(xì)介紹

色譜分析法有很多種類(lèi)，從不同的角度出發(fā)可以有不同的分類(lèi)方法。

從兩相的狀態(tài)分類(lèi)：

色譜法中，流動(dòng)相可以是氣體，也可以是液體，由此可分為氣相色譜法（GC）和液相色譜法（LC）。固定相既可以是固體，也可以是涂在固體上的液體，由此又可將氣相色譜法和液相色譜法分為氣-液色譜、氣-固色譜、液-固色譜、液-液色譜。上海液相色譜儀

另外，還有一種超臨界流體色譜法（supercritical fluid chromatography SFC），超臨界流體色譜是指用超臨界流體做流通相，以固體吸附劑（如硅膠）或鍵合到載體（或毛細(xì)管壁）上的高聚物為固定相的色譜法。超臨界流體是在高于臨界壓力和臨界溫度時(shí)的一種物質(zhì)狀態(tài)，它既不是氣體也不是液體，但兼有氣體和液體的某些性質(zhì)（藥物色譜分析主編丁黎人民衛(wèi)生出版社2008年7月*版）。

高效液相色譜法（HPLC）是繼氣相色譜之后，70年代初期發(fā)展起來(lái)的一種以液體做流動(dòng)相的新色譜技術(shù)。上海液相色譜儀

高效液相色譜是在氣相色譜和經(jīng)典色譜的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的?，F(xiàn)代液相色譜和經(jīng)典液相色譜沒(méi)有本質(zhì)的區(qū)別。不同點(diǎn)僅僅是現(xiàn)代液相色譜比經(jīng)典液相色譜有較高的效率和實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化操作。經(jīng)典的液相色譜法，流動(dòng)相在常壓下輸送，所用的固定相柱效低，分析周期長(zhǎng)。而現(xiàn)代液相色譜法引用了氣相色譜的理論，流動(dòng)相改為高壓輸送（zui高輸送壓力可達(dá)4.9?107Pa）;色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜（每米塔板數(shù)可達(dá)幾萬(wàn)或幾十萬(wàn)）；同時(shí)柱后連有高靈敏度的檢測(cè)器，可對(duì)流出物進(jìn)行連續(xù)檢測(cè)。因此，高效液相色譜具有分析速度快、分離效能高、自動(dòng)化等特點(diǎn)。所以人們稱(chēng)它為高壓、高速、高效或現(xiàn)代液相色譜法。

HPLC 系統(tǒng)一般由高效液相色譜儀主要由進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等組成。

其中高壓、色譜柱、檢測(cè)器是關(guān)鍵部件。有的儀器還有梯度洗脫裝置、在線脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、預(yù)柱或保護(hù)柱、柱溫控制器等，現(xiàn)代 HPLC 儀還有微機(jī)控制系統(tǒng)，進(jìn)行自動(dòng)化儀器控制和數(shù)據(jù)處理。制備型 HPLC 儀還備有自動(dòng)餾分收集裝置。

操作規(guī)程

一、液相色譜要放置在平穩(wěn)牢固的臺(tái)面上。

二、液相色譜要有可靠的接地。

三、高壓氣瓶要放置在陰涼、通風(fēng)處，通過(guò)減壓閥和機(jī)器連接。

四、使用氫火焰時(shí)，應(yīng)先開(kāi)助燃?xì)猓箝_(kāi)氫氣，關(guān)閉時(shí)應(yīng)先關(guān)氫氣，后關(guān)助燃?xì)?。注意檢查氫瓶、減壓　閥、連接管線是否泄漏，如有泄漏應(yīng)立即處理。

五、溫控設(shè)備，壓力表應(yīng)按規(guī)定進(jìn)行檢定。

六、儀器工作室，應(yīng)放置足夠數(shù)量的消防器材。

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